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PCR实验室的相关设置

要完成一组PCR实验，通常需要经过***配制、样品处理、核酸扩增和产物分析4个实验过程。

这4个实验过程的实验用房应相邻布置，组成一个***的PCR实验区。标准的PCR实验区包括:***准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区、各区配套的缓冲区及公共走廊。

PCR实验室整体平面布局某***PCR实验室平面布局如图1所示，整个区域有一个公用走廊，每个***实验区设有专门的缓冲区。通过压差控制，使整个PCR实验过程中***和标本免受气溶胶的污染，并且降低扩增产物对人员和环境的污染。

***准备区该实验区主要进行的操作为贮存***的制备、***的分装和主反应混合液的制备。

***和用于标本制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。***原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存***。

***准备区配备有2~8°C冰箱和-80°C冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。

房间的面积宜控制在15m2~20m2。本区的压力梯度要求为:相对正压状态，以防止外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染。

标本制备区该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。

标本制备区配备有2~8°C冰箱和-20°C冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。在标本制备区，还需要配备生物安全柜，用于进行提取核酸的操作。

04污染的预防与控制

PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中，常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然***组DNA的污染;***的污染以及标本间的污染。因此要避免污染，首先应是预防，而不是排除。

工作区域的严格划分，各个实验区域要有明显的标记(如醒目的门牌或不同的地面颜色等)，以避免各个不同实验区域设备物品、***等发生混淆。

合理的系统设置，合理的空调通风系统设置，尽量采用全送全排的空调系统;严格的气流压力控制，保证不同的实验区内不同的压力要求。

规范的操作，临床***扩增检验实验室的技术人员必须进行上岗培训，在实验操作过程中，操作者必须戴手套，并经常更换。清洁工作及时、正确。实验工作结束后，必须立即对本区进行清洁。

严格的管理:严格控制进出实验室的人员。在各个实验区域使用带有明显区别标志的工作服(如不同颜色)，当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域;尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。扩增产物分析区是的扩增产物污染来源，废液不能在实验室中倾倒，必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉，用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等;

总之，实验室建设是一个复杂的问题，这里不讨论人员的问题，实验室人员的培养与沉淀，也需要一个过程，在建设的过程中要因地制宜，不要生搬硬套，结合自己的实际慢慢摸索出适合自己发展的建设思路。科学合理建设实验室，更好的发挥实验室的作用。

PCR实验室建设PCR实验室如何分区？应该分3区还是4区呢？

标准的PCR实验室可分成4个区域，按操作流程包括：

1）

***准备区：扩增***的配制、分装、保存。

2）

样本制备区：样本分装，核酸提取、保存。

3）

核酸扩增区：提取纯化的核酸上机扩增。

4）

产物分析区：扩增产物结果分析，生成报告。

随着核酸检测方法的优化和实验仪器的功能强化，PCR实验走向了自动化和高通量，这大大降低了病毒检测的时间、提高了检测的效率，也改变了普通PCR实验室建设的平面布局。如全自动定量PCR实验室可设置为***制备区、样本处理区、核酸扩增和产物分析区，后两个区合并（用于新冠病毒检测的PCR实验室）。一体化自动化PCR实验室设置***制备和自动检测区，后三个区合并

其二需要对负压病房工程施工设备进行管理，在过程中可以实行定人定机制度体系，一个设备由专人进行操作和管理以及维护，这样的方式可以保障设备发挥出自身性能，同时保障压病房工程施工质量。因为专人使用可以使其精心保护设备，如果多人使用那么对设备的保护的效率与力度就会较差。施工设备在每次使用完成之后，都需要对其进行检查，发现问题及时进行维修，加强设备检修力度，这样不仅可以保障设备运行效率，同时还可以进一步减少其问题的发生、减低压病房工程施工设备的损耗，为提升施工进度而奠定基础。